配制培养基过程中应该注意什么问题

E邮轮网 2022-09-06 14:04 编辑:易绍 132阅读

1、为确认工作细胞库是否受到污染,病毒种子的工作种子批次是否受到污染,培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否受到污染,可通过细菌、真菌、支原体无菌试验确认和消除。同时,还应验证无菌试验介质的灵敏度。

实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。

2、高压灭菌设备和过滤灭菌设备应进行验证,以确保灭菌灭菌效果;高压灭菌设备调试前后每6个月进行一次验证,每灭菌前后(灭菌后至少一次)进行验证。

3、有毒区域应严格与无毒区隔离,并应设置独立的空气净化系统和培养箱。毒性区应在无毒区保持相对负压,防止病毒污染培养细胞(特别是细胞库)。

4、在基本培养基中加入抗生素,野生型菌株被杀死,营养缺陷型不能在基本培养基中生长而被保留下来。

扩展资料:

配制培养基过程中的其它相关介绍:

培养基各成分完全溶解后,应进行pH的初步调正,因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,例如,牛肉浸液约可降低pH0.2。而肠浸液pH却会有显著的升高。

因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH,保证培养基的质量。pH调正后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出。

参考资料来源:百度百科-培养基

参考资料来源:百度百科-基本培养基